Kawuono†Adres ma sani: OX11 0DE, Ingresa, Gedo mar Kidima, Park mar Sayans kod Gik Manyasani, Dietcote, Oxfordshire, Ingresa, Kambi mar Kidima mar Rieny mar Kidima.
(RC-LH1) en gik madongo ma nyalo konyo e loso gik ma nyalo miyo ler obed maler. Ne wakelo gik moko ariyo ma ne itiyogo e ng’iyo gik matin ma ne itiyogo e ng’iyo gik madongo ma ne itiyogo gi RC-LH1 ma ne owuok kuom yien ma nigi ng’injo. 2.65-Å ng’injo mar RC-LH114-W nigi ng’injo 14 mag LH1 ma orumo RC, ma ng’injono ng’injo gi protin W, to ng’injo ma onge protin-W en ng’injo mar RC chuth ma orumo RC. Oketo 16 mag LH1 mag ng’injo. Ka ipimo gik ma kamago, mano miyo ng’ato bedo gi ng’eyo matut kuom kaka gik moko nyalo timore e RC-LH1, moriwo nyaka lokruok ma ne pok ong’ere chon ka ng’ato oting’o gik moko e kar RC QB, kaachiel gi kama gik ma konyo gik moko nitie, ma konyo e Passgi nyaka e RC. Kaka protin mar W ochung’ makende, ogeng’o ng’injo mar LH1, kendo mano miyo bedo gi yo ma nyalo miyo ng’injo mar kinone gi kinolon obed mapiyo.
Teko ma yudore kuom fotosintesis nyalo konyo chiegni ni ngima duto e piny, kendo en gi nyalo maduong’ mar teknoloji mar chieng’. Kata obedo ni gikonyo e loso gik moko e piny mangima, bakteria ma ng’injo ma ng’injo bende nyiso yore mopogore opogore mag teko kod nyalo mar loko gik moko. Ginyalo geng’o ng’injo mar ler kendo gidongo kaka bakteria ma ok nyal ng’iewo gik moko e mudho, ginyalo loso nitrojen kod muya mar carbon daioksid, ginyalo loso haidrojen, kendo ketho gik ma nigi suya mamit (1-3). Mondo omi ler obed gi teko mar timo gik ma kamago, nyaka olok ler mapiyo kendo e yoo makare obed teko mar kemikol. Okang’no chakore ka antena ma mako ler ng’ado ler kendo otero teko ma omako nyaka e kambi mar dwoko (RC), ma omiyo chaja chako pogruok (4 – 7). Gima duong’ ma nyalo konyo e loso gik moko e bakteria ma ng’injo ma ng’injo gin gik ma nigi RC ma nigi kit 2, ma orumo gi gik ma nyalo ng’iewo ler 1 (LH1), ma loso gik madongo ma RC-LH1. LH1 olosi gi ng’injo mar αβ ma ng’injo, ma moro ka moro kuomgi riwo ng’injo ariyo mag bakteria (BChl) kod ng’injo achiel kata ariyo mag ng’injo (8-12). kata 17 αβ heterodimers ma orumo RC (9-13) e loop ma olor, to e gik mamoko madongo, peptides ma ng’ato nyalo ng’ado e wi ng’ato geng’o dhi nyime mar LH1 ma orumo ng’ato. 13-15). Yadh ma papo mantie gi ler ma iluongo ni Rhodopseudomonas (Rps.) en ranyisi mar gik mangima manyalo winjo teko kod oro mar elektron ma konyo e loso gi ler. Oganda mokwongo ma ne ochung’ ne kristal mar Rps. Model mar ng’injo mar RC-LH1 en RC, ma orumo gi ng’injo 15 mag LH1 ma opogore opogore, ma ng’injo ma ok ong’ere ma iluongo ni “Protin W” (14) geng’ore. 10.5kDa ma ok ondiki ni en protin ma nigi ng’injo adek ma ng’ato nyalo ng’ado e wi ng’ato (TMH) (16). <2Zepa> Wadwaro loko nying’ mar rpa4402 ma keto kod mar protin W obed pufW mondo obed kaka nying’ ma itiyogo ne jin ma keto kod mar RC-L, M (pufL, pufM) kod LH1α, β (pufA, pufB). Gima ber en ni, protin-W nitie mana e 10% mar RC-LH1, ma nyiso Rps. ng’ato nyalo ng’ado bura kuom gik moko ariyo mopogore opogore ma iluongo ni RC-LH1. Kae, wagolo ripot mar gik ma nigi ng’injo ma malo mag gik moko ariyo madongo, achiel nigi protin W kod αβ 14, machielo onge protin W kod ng’injo ma 16 ma LH1 oum. Ogandawa ochung’ ne lokruok ma ng’ato timo e ng’eyo RC-LH1 ma Rps. palustris, nikech wasenono kwan mar ji ma chalre mag kit ng’ato ka ng’ato kendo wan gi nyalo moromo mar keto maler peptide ka peptide kod gik ma oting’ore kod gik ma tudruokgi nitie. Ka ipimo gik ma kamago, mano nyiso ni protin adek mag TMH-W ma pok oyudre e ng’injo moro amora mar RC-LH1 nyaka sani, kelo yo mar ng’injo mar ng’injo mar ng’injo mar ng’injo mar ng’injo mar ng’injo. Ong’ere ni nitie kuonde ma lipid kod kinon ma orit ma nyalo tudruoke, kendo wasefwenyo lokruok manyien mar loso gik moko bang’ ka kinon kod RC oriwre, ma nyalo bedo maber ne RC mar gik ma ngima ma nigi oksijen. Gik ma wayudo miyowa ng’eyo manyien kuom kaka gik moko nyalo tudruok kendo lokore e RC-LH1 ma nigi bakteria ma ng’injo ma ng’injo ma ng’injo.
Mondo omi ng’ato otim nonro matut kuom gik ariyo ma yudore e Rps. ng’ato ka ng’ato, wapogo RC-LH1 ka RC-LH1 kokalo kuom yore mag kemikal ma ngima. Protin ma nigi ng’injo mar W (ma bang’e iluongo ni ΔpufW) ne olosi kuom ng’injo ma onge gi ng’injo mar pufW (16), kendo ng’injo achiel kende mar RC-LH1 ema nyalo loso. Protin ma nigi W ma nigi ng’injo, olosi gi ng’injo moro. Protin W mar kit ng’atno iloko ka itiyo gi tag mar His ma romo 10x e giko mare mar C, mondo gik ma nigi protin W onyalo riwre maber gi protin W mang’eny ma onge kuom keto chuma ma ok nyal wuotho. Gik ma ng’ato nyalo ng’ado e wi ng’ato (IMAC).
Kaka onyis e ranyisi mar 1, gik moko ariyogo duto nigi RC matindo adek (RC-L, RC-M kod RC-H) ma orumo gi antena mar LH1. 2.80-A mar ng’injo ma onge gi protin-W nyiso ni nitie αβ ma opogore opogore 16, ma loso ng’injo mar LH1 ma oum ma orumo RC chuth, ma bang’e iluongo ni ng’injo mar RC-LH116. 2.65Å mar ng’injo ma nigi protin-W nigi ng’injo 14 ma LH1 ma ng’injo-W ochung’ne, ma bang’e iluongo ni RC-LH114-W.
(A kod B) Ranyisi mar piny ma ng’ato oting’o. (C kod D) Pigment ma oriwre ma inyiso e rod. (E kod F) Gik ma ng’ato neno ka owuok e wi sitoplasma nigi peptide kod LH1 ma inyiso e katun, kendo giketo namba kaluwore gi saa kowuok e gap mantie e kind protin gi W [ma luwore gi namba ma Rba keto. gik ma ng’ato nyalo ng’ado (13)]. Ka LH1-α, rangi mar ng’injo mar protin en mar rangi ma ratong’; kuom LH1-β, rangi mar ng’injo mar protin en mar rangi ma bulu; kuom protin-W, protinno en makwar; kuom RC-H, en rangi makwar; kuom RC-L, en rangi ma ng’we ng’ar; kuom RC-M, rangi makwar. Kofaktors ochung’ne rod, rangi ma ralum ochung’ ne BChl kod BPh a, rangi ma papo ochung’ ne karotenoid, to rangi ma ratong’ ochung’ ne UQ10. (G kod H) Neno maduong’ mar pogruok mantie e kind protin kod W e alwora ma romre gi RC-LH114-W (G) kod RC-LH116 (H). Kofaktors inyiso e yo ma pong’o thuolo, kinone ma nigi kelo inyiso e rangi ma bulu. <2Zepa> Gap mar protin-W onyis gi ranyisi ma nigi rangi ma bulu e (G), to buche matindo ma quinone/kinolol landore e ring’o mar LH116 inyiso gi rangi ma rateng’ ma oting’o rangi makwar e (H).
(A kod B) nyiso RC ma orumo gi ng’injo ma oyawore kata ma olor mag LH1αβ, ma ng’ato ka ng’ato kuomgi riwo BChl ariyo kod ng’injo achiel (Fweny 1, C kod D). Gik ma osetimre chon osenyiso ni Rps en ng’injo mar LH1. E yo ma ng’ato nyalo ng’adogo gik ma ngima, kit gik ma kamago nigi gik ma opogore opogore ma nyalo miyo ng’ato obed gi nyalo mar timo gik moko (17). Kata kamano, spiropiroxanthin e ma nigi ng’injo mang’eny kendo ng’injo mare nyalo romo. Kuom mano, ne wayiero timo ranyisi mar spiroxanthin e kuonde duto ma LH1 riwrego. 10:10, 11. 10 TMH ma nigi ng’injo machuok ma nigi ng’injo matin (Fweny 1, A, B, E, kod F). Kata obedo ni ne ok oneno kwan mar gik ma odong’ e giko mar C, ne okethore gi alfa kowuok e Met1 nyaka Ala46 e gik moko ariyogo duto. 116, kendo kowuok e Ser5 nyaka Tyr52 e RC-LH114-W. Onge ng’eny mar 3 kata 4 mag N kata 13 mag C ma ne oneno (Fweny S1). 10:10, 11. 10 Kaka ng’ato nyalo ng’eyo ni RC-LH1 ma ne oting’o ng’injo ma ne olosi ka owuok kuom ng’injo ma ne oting’o ng’injo ma ne oting’o ng’injo ma ne oting’o ng’injo ma ne oting’o ng’injo, ne onyiso ni kama ne olalo ne en duoko mar ng’injo ma ne opogore opogore mag peptides ma kamago (Fweny S1 kod S2). α-Met1 bende ne oneno (f). Ong’eyo ni α-peptide nigi gik ma odong’ fMet1 nyaka Asp42/Ala46/Ala47/Ala50, to β-peptide nigi gik ma odong’ Ser2 nyaka Ala53, ma en gima winjore maber gi map mar ng’injo mar EM ma nigi ng’injo matin.
<2Zepa> Riwruok mar α-His29 kod β-His36 miyo BChls bedo wang’ gi wang’; αβ ka heterodimer chokore gi jowetene mondo olos ng’injo ma oyabere (RC-LH114-W) kata ng’injo ma olor (RC-LH116) ma orumo RC. Ka opim gi band mar 877 nm mar RC-LH114-W, 880 nm mar ng’ado mar RC-LH116 en 3 nm (Fweny 2A). Kata kamano, rang’iny mar dichroism ma ng’ato nyalo ng’iyogo en mana maromre (Fweny 2B), ma nyiso ni kata obedo ni nitie pogruok maler e kind loop ma oyabere kod ma oum, alwora ma BChls nitie chalo ahinya. 18, 19), lokruok ma timore e tudruok mar pigment ma kelo gi ng’injo ma olor (20, 21), kata riwruok mar gik ariyogi (11).
(A) Spektra mar ng’ado ler ma ok nenre/ma nenore/ma chiegni gi ler ma ok ng’ich, ma ng’injo mag ng’injogo ondiki gi rangi ma luwore gi ler ma ng’injogi kendo oket kaka ng’injo mar BPh ma ni e 775 nm. (B) Spektra mar dikroism ma ng’injo ma ng’ato nyalo ng’ado e wi BChl e 805 nm. (C kod D) Oyier spektra mag ΔA kowuok e spektra mag ng’ado gik ma ng’ato nyalo ng’ado e kinde ma ng’ato nyalo ng’adoe bura (C) kod RC-LH116 (D). Mondo obed gi nyalo mar pimo maber, spektra duto iloso nyaka ∆A mar −A e 0.2 ps. (E) Kido mar oksidasion mar saitokrom c2 bang’ ng’ado ler e kama nitie gik mopogore opogore mag UQ2 (neno ranyisi mar S8 mondo iyud weche ma ok otigodo). (F) E sel ma ne odongo e bwo ler ma piny, ma diere kata ma malo (10, 30 kata 300 μMm-2 s-1, kaka giluwore), protin W kod RC-L ma ni e ng’injo ma olosi kod kwan mar ng’injo ma opogore opogore. Ong’eyo kwan mar protin kokalo kuom ng’iyo gik ma ng’ato nyalo ng’ado e wi ng’ato (neno ranyisi mar S9 mondo iyud weche ma ok otigodo). 114-W ma oseler. Ratio mar RC-L gi protin-W mar gik ma opogore opogore en 1:1.
114-W (Fweny 1, A, C, kod E) ni machiegni gi ng’at ma chiwo RC (P) gi 6.8 Å moloyo BChls maromre e RC-LH116 (Fweny 1, B, S3); 114-W kod RC-LH116, kinde ma ng’ato nyalo ng’adogo teko mar ng’ato ka ng’ato kuom LH1 nyaka RC en 40 ± 4 kod 44 ± 3 ps (Fweny 2). , C kod D, Ranyisi S4 kod Tebol S2). Bende onge pogruok maduong’ e dwoko mar elektronik e kind RC (Fweny S5 kod ndiko ma medo tudruok). <2Zepa> Wageno ni tudruok machiegni mar kinde mar tero teko e kind LH1 kod RC-P en nikech bor, angle kod teko ma nyalo bedo maromre mar BChl mang’eny e loop ariyo mag LH1. Nenore ni ng’iyo kaka LH1 nigi teko mondo ochop e bor matin moloyo ok en gima mapiyo moloyo tero teko ma achiel kachiel kowuok kuonde ma ok ber nyaka e RC. RC-LH114-W bende nyalo bedo gi ng’wech ma ok nyal ng’eny e bwo ng’ich ma piny mar ng’iyo gik moko, kendo nitie ng’ich mabor mar αβ14 e ng’ich mar ot kowuok e bor mar ng’ich mar βBChls e kabedo mar RC 1.
RC-LH116 complex nigi BChls 32 kod carotenoids 16, kendo kaka oketgi duto chal gi ma yudore kuom pidpidum ma nigi ng’injo mar ng’injo. (12) kod lum ma ralum (10). Bang’ loso gik moko, ne oneno mana ng’injo matindo e kuonde ma αβ nitie, ahinya ahinya e 1-5, 15, kod 16 (Fweny S6). Ka nitie protin-W, mano nigi teko maduong’ ahinya e loso mar LH1. TMH mage adek oriwre gi ng’injo machuok, ma giko mar N ni e bath lumen mar ng’injono to giko mar C ni e bath lumen mar ng’injono (Fweny 1A kod 3, A nyaka D). 3B), kendo TMH2 kod TMH3 tudruok gi LH1αβ-14 mondo olos gik ma ng’ato nyalo ng’ado e wi ng’ato (Fweny 3, B kod E nyaka G). Oganda mathoth oting’o gik ma odong’ mag Phe, Leu kod Val e alwora mar ng’ut ng’ato. Gik ma odong’go iketo e wi asidi ma ok nyalo donjo e pi kod gik ma αβ-14 ma ng’ato nyalo ng’iyogo. Gik moko ma odong’ e polar bende konyo e loso gik moko, moriwo nyaka tudruok ma ni e kind W-Thr68 kod β-Trp42 e wi ng’injo ma ng’injo (Fweny 3, F kod G). E wi ng’et ng’ato, Gln34 ni machiegni gi grup mar keto mar αβ-14. Kaachiel gi mago, ne oket ng’injo mar n-dodecyl β-d-maltoside (β-DDM), kendo ng’injo mare ma ok nyalo ng’injo pi ne odhi nyaka e kind protin-W kod αβ-14, kendo ng’injo mar lipid nyalo bedo e ringruok. Bende, ne wafwenyo ni kuonde ma C-terminal nyalo ng’adoe bura mag protin W kod RCH ni machiegni ahinya, to ok gin e kind ng’wech mar loso tudruok makende (Fweny 1, A kod E). Kata kamano, nyalo bedo ni nitie tudruok e kind amino asidi ma pok otimre e giko mar protin ariyogi, ma nyalo miyo obed gi yo mar ng’ado protin-W e kinde ma RC-LH114-W ochokore.
(A) Protin-W, ma ochung’ e nyim tudruok gi LH1αβ14 e kit katun, nigi ng’injo ma chal gi rod (makwar), ma inyiso e achiel kuom picha mag nyalo mar stima (makwar ma nenore maler ma nigi rang’iny mar 0.13). (B) Protin-W ma ochung’ne gik ma nigi rangi ma ok ng’iyo gi pi. Kuonde ma nigi polar kod ma nigi chaji inyiso gi rangi ma cyan, kuonde ma ok ohero pi inyiso gi rangi marachar, to kuonde ma pi ohero ahinya inyiso gi rangi ma orange. (C kod D) Protin-W ma inyiso e katun, yo ma ochung’go en mana kaka ma ni e (A) (C), kendo olokore gi 180° (D). Kaluwore gi kaka gik moko nitie e ranyisi, gik ma odong’ ma nyalo pogore kawo rangi ma chal gi mar rainbow, ma giko mar N en mar bulu to giko mar C en mar rangi makwar. (E) Protin-W e wang’ machal gi ma ni e (A), kendo gik ma odong’ e kind protin-W:LH1 ochung’ne rod ma nigi ranyisi ma oketgi. (F) Protin-W iloko 90° ka ipimo gi (E) kod LH1αβ14 e ranyisi mar katun, kendo ka ipimo gi gik ma odong’ e kindgi e ranyisi mar bar. Gik ma odong’ ma ng’ato nyalo ng’ado e wi beta, ondikie nying’. Kofaktor inyiso kaka bar ma chal gi rangi ma ni e ranyisi mar 1, β-DDM ma osekethore inyiso gi rangi makwar, to oksijen inyiso gi rangi makwar. (G) Neno ma ni e (F) olokore 180°, ka nitie gik ma odong’ ma nenore maler mag alfa ma ondikie ni.
Protin-W kawo kar αβ ma nigi ng’injo (ma en mar 15 e ranyisi mar 1F), ma omiyo ogeng’o ng’injo mar loop kendo ng’injo adek mokwongo mag αβ. Ne oneno ni ng’injo maduong’ mar αβ-1 mokwongo ma ne ochung’ne ng’injo ma ne en-go ne en 25° nyaka 29° (Fweny 1, A kod E), ma ne olosi gi ng’injo ma 2° nyaka 8° mar αβ-1 e RC A ma ne opogore ahinya-LH116 kod Fweny 1, B). Heterodimer mar ariyo kod mar adek ochung’ e 12° nyaka 22° kod 5° nyaka 10°, kaka giluwore. Kaluwore gi geng’ruok mar RC, ng’injo mar αβ-1 ok oriwo αβ mar ariyo (ma chal gi αβ mar 16 e ranyisi mar 1F), omiyo, omiyo bedo gi pogruok maler e ring’o mar LH1 (ranyisi mar 1, A kod E) . Kaluwore gi bedo maonge gi αβ ariyo ma opogore opogore, ma luwore gi ketho mar BChl ang’wen kod gik ma kelo ng’injo ariyo, onge ng’ato kuom gik ma ng’ato nyalo ng’iyogo ma riwre gi αβ-1 ma otur, ma miyo bedo gi ring’o mar LH114-W ma nigi gik ma ng’ato nyalo ng’iyogo 13 mag ng’ato ma ok chamo ring’o kod BChl 28. 10:10, 11. 10 Gik ma ng’ato nyalo ng’ado e wi gik moko ariyo ma ni e alwora mag αβ1 nyaka 7 gin piny moloyo gik ma ng’ato nyalo ng’ado e alwora mamoko mag LH1, ma nyalo nyiso ni ng’ato nyalo bedo gi ng’eyo ma ng’ato nyalo yudo kuom ng’ato ka ng’ato ma ni e alwora mar RC QB (Fweny 4) .
114-W (A kod B) kod RC-LH116 (C kod D) inyiso kowuok e neno maromre ma malo/neno e bath (A kod B) (A kod C) kod ng’et ng’et ng’et ng’et ng’et 1. (B kod D). Kido ma nigi rangi inyiso e bath lwet korachwich.
13:14, 13. 13 En mana ni ng’at machielo ma nigi kido mar ng’ato ma nigi ng’injo mar 1:14 en ng’at ma nigi kido mar ng’injo ma ng’ato nyalo ng’eyo. Kata kamano, protin W kod PufX onge gi tudruok ma nenore maler, kendo gin gi teko maduong’ ahinya e loso mar LH1 maggi. PufX en TMH achiel ma nigi ng’injo mar N ma tudruok gi ng’injo mar RC-H (13) e kabedo ma luwore gi Rps. LH116αβ-16. PufX loso yo mar loso gik ma ng’ato nyalo ng’ado e kind RC-LH1 kod gik ma ng’ato nyalo ng’ado e kind ng’ato kendo nitie e Rba duto. ng’at ma nigi ng’ol (13). Kata obedo ni tudruok mar ng’ato gi ng’ato ni e Rba. 114-W, kendo gap ma PufX kod protin-W kelo ni e kama maromre (Fweny S7A). 114-W bende owinjore gi ng’at ma ng’ado bura (8) mar ng’at ma ng’ado bura, ma olosi gi peptides ma ok owinjore gi protin W kata PufX (Fweny S7B). Kaachiel gi mago, chanel mar kinon ma ni e Blc. LH1 ma ralum ma olosi kuom golo oko γ achiel (7) nitie e kabedo ma chal kamano (Fweny S7C). Kata obedo ni ng’ato nyalo ng’ado bura gi protin mopogore opogore, nenore ni ng’ato nyalo bedo gi ng’eyo maromre e RC-LH1, nenore ni en ranyisi mar ng’ado bura ma ng’ato ka ng’ato nyalo ng’ado, ma nyiso ni pogruok ma ng’ato nyalo ng’ado gi protin W nyalo tiyo kaka ng’ato ma nyalo ng’ado bura.
1G), kar tudruok mar domen ariyogo kokalo kuom ng’injo mar protin kaka e protin. RC-LH116 ma ng’ato nyalo ng’eyogo chal gi Tch ma olor. Gik ma chal gi ng’injo (22) (Fweny 1H). Kaka ng’injo mar quinone kokalo kuom ng’injo ng’injo mapiyo moloyo ng’injo kokalo kuom yo matin mar protin, ng’injo mar LH114-W ma oyabere nyalo miyo RC olokre mapiyo moloyo ng’injo mar LH116 ma oum, kendo ng’injo mar kinone e RC nyalo bedo ma ok ng’injo ahinya. Mondo watem ka be protin W nyalo ketho loko gik ma ng’ato nyalo ng’ado kokalo kuom RC, ne watimo nonro mar oksidasion mar gik ma ng’ato nyalo ng’ado e wi kwan moro mar gik ma ng’ato nyalo ng’ado e wi ng’ato (UQ2) (ma en gik ma chal gi UQ10 ma ng’ato nyalo ng’ado e wi ng’ato ma nigi ng’ut matin) (Fweny 2E). Kata obedo ni bedo ni nitie quinone ma nigi chelated geng’o ng’eyo makare mar gik ma nenore ni ok lokre (RC-LH114-W kod RC-LH116 gin gik ma owinjore gi 0.2±0.1μM kod 0.5±0.2μM, kaka giluwore), kwan maduong’ mar RC-LH114-114-0. 28±5% maduong’ moloyo RC-LH116 (3.6±0.1 e-RC-1 s-1).
Ne waparo mokwongo ni protin-W nitie e kwan mar 10% mar gik ma ng’ato nyalo ng’ado (16); 15±0.6%, 11±1% kod 0.9±0.5, kaka giluwore % (Fweny 2F). 10:10, 11. 10 Ka ipimo kwan mar gik ma ng’ato nyalo ng’eyo, mano nyiso ni medo kwan mar gik ma ng’ato nyalo ng’eyogo ne ok odwoko piny kwan mar protin-W ka iporo gi kwan mar gik ma ng’ato nyalo ng’iyogo (P = 0.59), omiyo, kwan ma kamago ok en gik ma ng’ato nyalo ng’eyogo gik ma ng’ato nyalo ng’eyogo (Fweny S10). Kata kamano, bedo matin mar protin-W e RC-LH1 nyalo miyo RC moko otur e ng’wech mapiyo, ma miyo ng’wech mar RC-LH116 bedo matin. Ne waneno ni kwan maduong’ mar ler ma ng’ato odak e iye ok rwakre gi weche ma osetimre machiegni, ma nyiso ni ng’eyo mar pufW medore e bwo ler matek (Fweny S11) (23). Pogruok mantie e kind ndiko mar pufW kod keto protin-W e RC-LH1 en gima kelo ywak kendo nyalo nyiso kaka protinno rito gik moko e yo mapek.
RC-LH114-W, 6 kardiolipin (CDL), 7 fosfatidilkolin (POPC), 1 fosfatidylgliserol (POPG) kod 29 mag β-DDM oketgi kendo giloso e iye 6 CDLs, 24 POPCs, 2 POPGβDM 12. (Fweny mar 5, A kod B). E gik ariyogi, CDL chiegni ni ni e ng’et ng’et ng’ut ng’ato, to POPC, POPG kod β-DDM thothne ni e ng’et ng’et ng’ut ng’ato. 114-W (Fweny 5A), kendo abich ne oket e ng’et RC-LH116 maromre (Fweny 5B ). Ne oyudre ni lipid mang’eny e bath ng’injono, ma ne gin CDL, ma ne ochokore e kind RC kod αβ-7 nyaka αβ-13 (Fweny 5, A kod B). 114-W, kendo ma ng’ato nyalo ng’eyo ni en β-DDM e RC-LH114-W, kendo ma ng’ato nyalo ng’eyo ni en β-DDM e RC A. 12:10, 11. 12 Gik ma chalre mag lipids kod gik ma ng’ato nyalo ng’ado e ringrewa nyiso ni gin kuonde ma nyalo tudruok gi ringruok (Fweny S12A). Kabedo mag molekul maromre e Tch bende nigi tudruok maber. Ng’at ma ng’won kendo ma Trv. 970 RC-LH1s (Fweny S12, B nyaka E) (9, 12) kod gik ma odong’ ma tudruok mag hydrogen mag grup mar wich mar lipid ne onyiso ni ne girito maber ahinya e loso gik ma luwore (Fweny S13), ma nyiso ni CDL ma ne orit ma ne oriw gi RC (24), kuonde ma ne orit e RC.
(A kod B) Peptide mag RC-LH114-W (A) kod RC-LH116 (B) inyiso gi katuni, to rangi ma itiyogo inyiso gi rod, ka itiyo gi rangi ma ni e ranyisi mar 1. Lipid inyiso gi rangi makwar, to gik ma itiyogo e lwoko gik moko inyiso gi rangi makwar. UQ ma ochung’ne kuonde mag RC QA kod QB en mar rangi ma ratong’, to UQ ma opogore en mar rangi ma rambulu. (C kod D) Paro machal gi mag (A) kod (B), ma ok oket weche ma ng’ato nyalo ng’eyo. (E nyaka G) Neno maduong’ mar Q1 (E), Q2 (F) kod Q3 (G) kowuok e RC-LH116, ka nigi ng’injo mag bathe ma mulo ng’ato ka ng’ato. Bond mag haidrojen inyiso kaka laini ma nigi rangi makwar.
RC-LH116, RC QA kod QB UQ duto, ma gin e tich mar tero elektron e chenro mar pogo chaja, gipodho e kuonde ma gitudoree. Kata kamano, e RC-LH114-W, pok oyudre kendo ibiro wuoyo kuom wachno e yo matut piny kae. Kaachiel gi QA kod QB, ng’injo ariyo mag UQ (ma ni e kind ring’o mag RC kod LH1) ipogo e ng’injo mar RC-LH114-W kaluwore gi grup mag wichgi ma oseloso maber (ma ni e Q1 kod Q2, kaka giluwore). thuolo). Goro mar 5C). 10:10, 11. 10 Giketo unit ariyo mag isopren e Q1, kendo map mar ng’eny mar isopren loso gik ma 10 ma opong’o mag isopren mag Q2. E loso mar RC-LH116, ne oket ng’injo adek mag UQ10 (Q1 nyaka Q3, Ranyisi 5D), kendo ng’injo duto nigi ng’injo maler e ng’injo duto (Ranyisi 5, D nyaka G). E loso ariyogo, kuonde ma grup mag wich mag quinone mag Q1 kod Q2 nitie nigi tudruok maber ahinya (Fweny S12F), kendo giloso mana gi RC. 1G kod 5, C, D kod E), to Q2 ni machiegni gi kama QB riwre (Fweny 5, C, D) kod F). 143 kod L-Trp269 ma odong’ machiegni ahinya gi Q1 kod Q2 kendo gichiwo nyalo mar tudruok mag π (Fweny 5, E kod F, kod Fweny S12). 3.0 Å kowuok e oksijen mabor mar Q1, miyo tudruok matek mar haidrojen (Fweny 5E); ng’injoni orit e RC duto mak mana tudruok mabor ahinya (Fweny S13). L-Ser91 ochung’ne Thr e RC mamoko mang’eny (Fweny S13), en angstrom 3.8 kowuok e oksijen mar metil mar Q1, kendo onyalo miyo ng’ato obed gi tudruok matin (Fweny 5E). Q3 ok nenre ni nigi tudruok moro makende, to en e alwora ma ok ohero pi e kind ng’injo mar RC-M kod ng’injo mar LH1-α 5 nyaka 6 (Fweny 5, D kod G). Q1, Q2 kod Q3 kata gik ma ni machiegni bende osetimre e Tch. Muol, Trv. 970 kod Blc. 10, 12) nyiso ni nitie kama orit ma konyo e tudruok mar quinone e ng’injo mar RC-LH1 (Fweny S12G). 116 UQs abich ma osekethore e RC-LH116 ni e winjruok maber gi 5.8±0.7 mar UQ ka ng’ato ka ng’ato ma ng’ato ka ng’ato ma ng’iyo gi ng’ato ka ng’ato ma ng’iyo gi ng’ato ka ng’ato, to UQ adek ma osekethore e RC-LH114-W ni piny moloyo kwan mar 6.2±0.3 ma ng’ato ka ng’ato nyalo ng’eyo. ot.
<2Zepa> L kod M ma nigi TMH abich kendo giloso gik ma opogore opogore ma riwo dimer achiel mar BChl, dimer ariyo mag BChl, dimer ariyo mag BChl, kod dimer achiel ma ok en Heme kod molekyul achiel kata ariyo mag UQ10. Kaluwore gi bedo gi tudruok mag haidrojen e grup mar ketone ma giko kod ng’eyo ni ochokore e Rps, karotenoid donjo e grup mar M, ma iluongo ni cis-3,4-dehydroorhodopin. Kido mag lee (25). Domen mar ng’injo ma oko mar RC-H ochung’ne ng’injono gi TMH achiel. RC ma duto ochung’ne chalo gi RC adek madongo mag kit gik ma tudruokgi nitie (kaka Rba). ng’injo (PDB ID: 3I4D). 116 (Fweny S15).
Ka ng’ato nigi RC ariyo ma nigi kwan mopogore opogore mar jogo ma odak e kar QB, mano miyo thuolo manyien mar nono lokruok ma luwore gi ng’ato ka ng’ato ma luwore gi tudruok mar QB quinone. 116 RC-LH116, ng’injo mar QB ni e kabedo ma “machiegni” ma oting’ore chuth (26), to pogruok mar RC-LH114-W onge gi ng’injo mar QB. 114-W, ma en gima kelo wuoro nikech ng’injono tiyo, moloyo ng’injono ma nigi ng’injo mar QB ma ochung’ne loso. Kata obedo ni ring’o ariyo mag LH1 kelo quinones madirom auchiel, abich gin gik ma nyalo losore e ring’o mar RC-LH116 ma olor, to adek kende ema ochung’ne ring’o mar RC-LH114-W ma oyabere. 114-W QB nyalo lokore mapiyo, ng’ato nyalo ng’ado ng’wech mapiyo e ng’wechno, kendo ng’ado bura mapiyo mar ng’ado ng’wech mar LH1. 114-W nyalo bedo ni en duoko mar gik ma ng’eny kendo ma tiyo ahinya, kendo QB mar RC-LH114-W osebedo ka ng’ich mapiyo e ng’wech mar UQ.
Ka onge QB, ng’wech ma luwore gi L-Phe217 nyaka e kama ok owinjore gi ng’wech mar UQ10, nikech mano biro kelo ng’wech mar ng’wech gi ng’wech mokwongo mar ng’ut ng’ato (Fweny 6A). Kaachiel gi mago, lokruok madongo ma nenore maler mag loso gik moko nenore ayanga, ahinya ahinya helix de (helix machuok e loop ma ni e kind TMH D kod E) kama L-Phe217 ilokore e poket ma riwo QB kendo ng’ado L-Tyr223 (Fweny 6A ) Mondo oketh tudruok mar haidrojen ma riwre gi M-4. ng’ato (Fweny 6B). Helix de pivots e giko mare, Cα mar L-Ser209 lokore gi 0.33Å, to L-Val221Cα lokore gi 3.52Å. Onge lokruok ma nenore e TMH D kod E, ma gin gik ma nyalo keto e wi gik moko ariyogo (Fweny 6A). Kaka wang’eyo, mae e gedo mokwongo e RC mar piny ma ng’ado kar QB. Ka ipimo gi ng’injo ma opong’o (ma ochung’ne QB) nyiso ni kapok ng’injono odok piny, dwarore ni otim lokruok e kit ng’injono mondo odonj e ng’injono. L-Phe217 ng’ielre mondo olos tudruok mar π-staking gi grup mar wich mar quinone, kendo helix ng’ielre oko, ma miyo ng’ut L-Gly222 kod ng’injo mar bath L-Tyr223 loso tudruok mar haidrojen ma nigi tudruok mar haidrojen motegno (Fweny 6, A kod C).
(A) Katun ma ng’ato ka ng’ato oting’o holgram (ng’injo mar L, ng’injo mar ng’injo/M, ng’injo mar rangi ma ng’injo) kod apo (ng’injo mar rangi ma ng’injo), ma gik madongo ma odong’ inyiso e yo ma chal gi ng’injo mar ng’injo. UQ10 ochung’ne bar ma ratong’. Laini ma nigi dots nyiso tudruok mag haidrojen ma olosi e gik moko duto ma ng’ato oting’o. (B kod C) Ranyisi mar ng’injo mar ng’injo kod ng’injo duto mar ring’o, ma nyiso oksijen ma ni e bath ng’injo mar L-Phe217 e rangi ma bulu kod L-Tyr223 e rangi makwar, kaka giluwore. L en mar rangi mar orange; ng’injo mag M kod H ok oket rangi. (D kod E) (D) kod (E) duto (E) kuonde ma RC QB [rangi gi (A) kaka giluwore] kod PSII (ma ralum, ma bulu gi plastik ma nigi quinone; ID mar PDB: 3WU2) Keto (58).
Kaka ng’ato ok geno, kata obedo ni nitie gik mathoth ma nyalo miyo RCs ma nigi ng’ol mar QB ma onge LH1 oyudre, lokruok ma ne oneno e nonro ni pok ondik chon. Gigi oriwo loso mar QB ma wuok e Blc. (27), Ranyisi (28) kod Rba. (29), ma gin duto chiegni ni chalre gi kaka giloso QB duto. Ka ng’ato otimo nonro matut kuom 3PRC, ne oneno ni gik ma ng’ato nyalo ng’ado e wi ng’ato nyalo ng’ado e dhoot mar kar QB, ma nyalo geng’o ng’ato mondo kik oketgi kendo obed kaka gik ma ng’ato nyalo ng’ado. Kata obedo ni LDAO ok ng’injo e kabedo maromre e 1EYS kata 1OGV, RCs gi iloso ka itiyo gi gino maromre kendo kuom mano ginyalo kelo gik maromre. Oganda ma nigi kristal mar Rba. 1L9B) bende nenore ni nigi kar QB ma oum. Kata kamano, e yo ma kamano, ng’et N-terminal mar RC-M (ma tudruok gi kama QB tudruok kokalo kuom tudruok mar H mar Tyr ma odong’ e helix mar Q) kawo ng’iyo ma ok en mar piny, kendo lokruok mar ng’iyo mar QB ok ng’adne bura matut (30 ). Gima jiwowa en ni pok waneno ng’injo ma kamano mar ng’injo mar M e ng’injo mar RC-LH114-W, ma chiegni ni chal gi ng’injo mar N-terminal mar RC-LH116 RC. Bende, onego wang’e ni bang’ golo antena mar LH1 ma nigi gik ma ng’ato nyalo ng’adogo, RCs ma ne ni e PDB ne okethore, ma ne oketho pong’o mag quinone ma ne ni e iye kod lipids ma ne ni e kind RC kod ng’et ma ne ni e iye mar ring’o mar LH1 ma ne orumogi (31, 32). RC pod tiyo nikech orito gik moko duto ma konyo e loso gik moko, mak mana gik ma nyalo kethore ma iluongo ni QB, ma ok nyal ng’injo ahinya kendo ma kinde mang’eny lal e kinde ma iloso gik moko (33). Kaachiel gi mago, ong’ere ni golo LH1 kod lipids ma ng’ato nyalo ng’ado e RC nyalo bedo gi teko kuom tije, kaka dwoko piny kinde mar ngima mar ng’at ma nigi charge ma opogore gi P+QB (31, 34, 35). Omiyo, waparo ni bedo ni nitie ring’o mar LH1 ma ni e alwora ma orumo RC nyalo rito kar QB ma “oum,” kendo e yo ma kamano, rito alwora ma ni machiegni gi QB.
Kata obedo ni apolipoprotein (maonge QB quinone) kod loso ma opong’o nyiso mana piche ariyo mag ng’wech mar kar QB, kar nyiso ni ng’ato nyalo bedo gi gik ma timore, nitie gik ma nyiso ni tudruokno nyalo bedo gi gate mondo ogeng’ tudruok kendo gi hydroquinone Mondo ogeng’ geng’ruok mar gik ma ni e iye. <2Zepa> Gik ma ng’ato nyalo timo machiegni gi kama QB mar apolipoprotein nyalo bedo mopogore, ma miyo RC kwedogi. Ne osebedo ka iparo kuom kinde malach ni lokruok ma timore e kit ng’ato nigi tich maduong’ e tudruok kendo duoko piny quinones. RCs ma osebedo ka ng’ich nyalo dwoko piny kwan bang’ ng’iyo gi mudho, nyalo kethore (36); 26) , 37). <2Zepa> Waparo ni ng’at ma ng’ado bura mabor ni en ranyisi mar chal ma ni e kind apolipoprotein kod ng’at ma nigi ring’o ma opong’o, ma luwo tudruok mokwongo gi quinone kod ng’ado mar kar QB.
RC mar kit II ma yudore e PSII mar bakteria moko ma nyalo chamo ler kod bakteria moko ma nyalo chamo ler, algae kod yien nigi rito mar loso kod tiyo (38). (D kod E) nyiso kaka RC mag PSII kod kar QB mar RC mar bakteria chalo. Opim ma kamano osebedo kaka ranyisi kuom kinde malach mar somo sistem ma tudruok machiegni ahinya mar tudruok kod dwoko piny quinone. 39, 40, 40. 10:10, 11. 10 Oboke ma ne ondiki chon ne nyiso ni lokruok ma timore e kit ng’ato dhi kanyakla gi PSII ma dwoko piny gik ma ng’ato nyalo timo. Omiyo, ka iparo kaka RC ochung’ motegno, yo ma ne pok oneno chon mar tudruok nyalo bende tiyo e kar QB mar PSII RC e yien ma nigi oksijen ma nyalo chamo ler.
Rps ΔpufW (weyo pufW ma ok ondiki) kod PufW-His (ng’at ma nigi ranyisi mar 10x ma nigi ranyisi mar C ma onyisre kowuok e kar pufW ma en mar piny) ma ng’ato nyalo ng’ado. 009 ne olere e tijwa mokalo (16). 15:10, 11. 15 Gik ma kamago kod gik ma ng’ato nyalo ng’ado e wi ng’ato ka ng’ato ne yudore e friza kuom keto kwan matindo mar seche moko e wi PYE (lita 5 g -1) (ma oket e LB e -80 °C, ma nigi 50% (w/v) mar glycerol, gik ma owuok e yisti kod gik ma owuok e yisti. Ne oket plateno e otieno achiel e mudho e ng’ich mar ot e bwo ng’ich mar ot, kae to ne oketo ler marachar (~50 μmolm-2 s-1) ma ne omiye gi ler ma OSRAM ma nigi 116-W (RS Components, UK) kuom ndalo 3 nyaka 5 nyaka ne ng’injo achiel ne oneno. ml mar ng’injo mar M22+ (41) ma ne omed gi 0.1% (w/v) mar asidi mag kasamino (ma bang’e iluongo ni M22). Ne odongo ng’injono e bwo oksijen matin e mudho ma 34°C ka ng’injono ng’injo e 180 rpm kuom seche 48, kae to ne oket ml 70 mar ng’injono e piny ma kamano kuom seche 24. ml mar M22 ma nigi ng’injo mar 1 ml itiyogo mar keto 30 ml mar gik ma ng’ato nyalo ng’ado e chumbe ma ng’ato nyalo ng’iyogo kendo ma ng’ato nyalo ng’iyogo gi ng’ato ka ng’ato kuom seche 48 ka otiyo gi teko mar magnet ma ok ng’ato nyalo ng’iyogo. Kae to 30 ml mar ng’injono ne oket gi ng’injo ma romo lita 1 e bwo gik maromre, ma bang’e ne otigodo e keto ng’injo ma romo lita 9 ma ne oting’o ler ma romo ~200 μmolm-2 s-1 kuom seche 72. ml mar tris-HCl (pH 8.0), kendo oketogi e -20°C nyaka chop dwarore.
Bang’ ng’ado ng’injo, med kristal moko mag deoxyribonuclease I (Merck, Ingresa), lysozyme (Merck, Ingresa) kod tablet ariyo mag Roche ma geng’o ng’injo mar ng’injo (Merck, Ingresa) e sel ma osebedo ka ng’injo kendo. E sel ma ne nigi psi 20,000 (Aminco, Amerka), selgo ne okethore nyadi 8 nyaka 12. Bang’ golo sel ma ok otur kod gik ma ok nyal ng’injo kuom ketogi e 18,000 RCF kuom dakika 15 e 4°C, ne giwuok gi lysate ma ne nigi rangi kuom ketogi e 113,000 RCF kuom seche 2 e 43,000°C. 100 nyaka 200 ml mar 20 mM tris-HCl (pH 8.0) kendo oket gik ma nyalo ng’injo nyaka chop kama onge gik ma nenore ma nyalo ng’injo. Ne oket ng’injono e 20 mM tris-HCl (pH 8.0) (Anatrace, Amerka) ma ne nigi 2% (w/v) β-DDM kuom seche 1 e mudho e 4°C ka ng’injono ng’injo mayom. Kae to, ng’ad RCF 150,000 e 4°C kuom seche 1 mondo ogol gik ma ok nyal ng’injo ma odong’.
ml mar DEAE Sepharose ma ne oting’o ng’injo adek (CV) mar ng’injo adek (CV) mar ng’injo adek (20 mM tris-HCl (pH 8.0)) ma nigi 0.03% (w / v) β-DDM]. Los kolomno gi gik ariyo ma riwo CV, kae to oloso kolomno gi gik ariyo ma riwo CV ma nigi 50 mM NaCl. 150 nyaka 300 mM NaCl (e bafa mar tudruok) e 1.75 CV, to ng’injo ma ne odong’ ne ogol gi bafa mar tudruok ma nigi 300 mM NaCl e 0.5 CV. 1000 nm, keto ng’injo ma nigi ng’injo (A880/A280) ma malo moloyo 1 e 880 nyaka 280 nm, ng’injo nyadi riyo e buffer ma riwo, kendo tiyo gi yo machalno kendo e wi ng’injo mar DEAE E wi ler. 1.7 kod A880/A805 ma malo moloyo 3.0, timo round mar adek mar loko ion, kendo orit ng’injo ma nigi ratio mar A880/A280 ma malo moloyo 2.2 kod A880/A805 ma malo moloyo.0. 100,000 molekyu mag molecule cut-off filta (MWCO) (Merck, UK), kendo oketgi e wi ng’injo ma ng’injo ma ng’injo (GE Healthcare, Amerka) ma nigi buffer ma nigi 200 ml, 1.5 Siv. <2Zepa> Chok spektra mag ng’ado mar ng’injo mar ng’injo mar ng’injo mar ng’injo, kendo keto spektra mag ng’injo ma nigi kwan mar A880/A280 ma loyo 2.4 kod kwan mar A880/A805 ma loyo 5.8 nyaka 100 A880, kendo mapiyo piyo iti kodgi e loso kata kano grid mar cryo-TEM Keto e -8°C.
ml tris-HCl (pH 8.0) ma nigi 200 mM NaCl kod 0.03% (w/w)) e buffer mar IMAC (GE). v) β-DDM]. Ne oloso kolomno gi CV abich mag IMAC, kae to ne otiyo gi CV abich mag IMAC ma ne nigi 10 mM mar histidine. 100 mM mar histidine ne ogol oko mar ng’at ma ne ochung’ ne IMAC. 100,000 MWCO (Merck, UK), ma oting’o ng’injo nyadi 20 gi buffer ma riwo gik moko, kae to omedi e 25 ml mar ng’injo ma ng’ato nyalo ng’injogo. motelo. 100 mM NaCl (e gik ma riwo CV), kendo CV ang’wen ma odong’ nigi gik ma riwo 100 mM. 100,000 MWCO, kendo ne opong’ gi 1.5 CV IMAC motelo. 1.5 Siv. 2.1 kod 4.6 nyaka 100 A880, ma itiyogo mapiyo piyo e loso grid mar TEM ma ng’ich kata iketo nyaka -80°C.
Ne otiyo gi friza ma iketo e pi ma iluongo ni Leica EM GP mondo olos grid mag TEM ma ng’ich ma ok ng’ich ahinya. 1.2/1.3 ma ne oting’o ng’injo mar 50, kae to ne oketo 5μl e wi ng’injo manyien ma ne oting’o ler ma ng’injo. 20°C kod 60% mar ng’ich mar ng’ich kuom sekon 30, bang’e ng’ich kuom sekon 3, kae to ng’ich e ethane ma ng’ich e -176°C.
RC-LH114-W complex ne ondiki e eBIC (Centre mar ng’iyo gik ma ngima) (Kambi mar ler ma ng’ato nyalo ng’iyogo gik moko) ka otiyo gi gino ma ng’ato nyalo ng’iyogo gik matin ma ng’ato nyalo ng’iyogo, ma tiyo gi teko ma ng’ato nyalo ng’iyogo gik ma ng’ato nyalo ng’iyogo, ma tiyo gi teko ma ng’ato nyalo ng’iyogo gik moko mapiyo ma romo 300 kV, ma nigi teko ma ng’ato nyalo ng’iyogo gik moko ma ng’ato nyalo ng’iyogo. Ne otiyo gi gino ma ng’ato nyalo ng’eyogo gik ma ng’ato nyalo timo mondo oket piche e yor kwano mondo ochok weche. Piksel ma opim en 1.048Å, to kwan mar dos en 3.83 e-Å-2s-1. Ne ochoko sinemano e sekon 11 kendo ne opogogi obed migepe 40. Ti kod kama oting’o carbon mondo ilok gik ma ng’ato neno gi wang’e kendo, kae to ichok sinema adek e bur ka bur. Kaka duto, ne ochoko sinema 3130, ma ne nigi kwan mar gik ma ne ok oneno e kind -1 gi -3 μm.
116 RC-LH116 ne ochoki ka otiyo gi gino ma ng’ato nyalo ng’iyogo gik matindo ma ng’ato nyalo ng’iyogo gik moko madongo ma ne ni e kar ng’iyo gik ma ngima (Yunivasiti mar Leeds, piny Ingresa). 130 k, kendo duong’ mar piksel ne opim nyaka 1.065 Å ka itiyo gi dos mar 4.6 e-Å-2s-1. Ne oket sinemano e sekon 12 kendo ne opogogi e migepe 48. Kaka duto, ne ochoko sinema 3359, ma ne nigi kwan mar gik ma ne ok oneno e kind -1 gi -3 μm.
Gik moko duto ma itiyogo e ng’ado bura itimo e paip mar Relion 3.0 (42). (43) mondo ilos ng’wech mar beam kuom ng’ado pek mar dos, kae to ti gi CTFFIND 4.1 (44) mondo ing’e paramita mar CTF (tich mar ng’ado gik ma opogore opogore). S16. Fotomikrograf ma pile ka pile bang’ ng’ado ng’wech mokwongogi onyisre e ranyisi mar 2. S16. Template mar yiero ma otomatiki iloso kuom yiero gi lwedo piksel madirom 250 mag gik matin 1000 e frem mar piksel 250 kendo onge ranyisi mar ng’injo ma nigi rang’iny ariyo (2D), e yo ma kamano, idagi ng’injogo ma romo gi ng’injo mar sampul kata ma onge kido ma ng’ato nyalo ng’eyo. Bang’e, ne otim yiero ma otomatik kuom piche duto ma ne okaw, kendo RC-LH114-W ne nigi gik madongo 849,359, to gik madongo ma ne oting’o RC-LH116 ne nigi gik madongo 476,547. Gik moko duto ma oyier osekalo e raun ariyo mag ng’ado 2D ma ok ochung’ne ng’ato ka ng’ato, kendo bang’ ng’ado ng’ato ka ng’ato, ng’ato ka ng’ato ma romo gi kar karbon, ng’injo mar sampul, onge gik ma nenore ayanga kata ng’injo ma ng’injo matek, ok oyiego, ma omiyo ng’injo ma romo 772,033 (90.9%) kod 359,678 mar ng’injo gin d. RC-LH114-W kod RC-LH116 kaka giluwore. Model mokwongo mar 3D ne olosi ka oti kod yo mar dok piny ma ng’ato nyalo ng’iyogo. Ka itiyo gi ranyisi mokwongo kaka ranyisi, gik ma oyiergo ipogo e migepe ang’wen e 3D. Ka itiyo gi ranyisi ma ni e kidienyni kaka ranyisi, tim 3D loso kuom gik matin ma ni e kidieny maduong’ie moloyo, bang’e ti gi filta ma 15Å ma ng’ato nyalo ng’adoe piny mondo oumo kama ng’ato nyalo ng’adoe gik moko, med piksel 6 mag bathe mayom, kendo loso pikselgo bang’e mondo ilos gik ma ng’ato nyalo ng’ado e wi Gatan K2. 114-W, ranyisi mokwongoni ne oloki kuom golo ng’injo matek ma ne ni e bath mask (ma ne okethore gi ng’injo mapek ma ne ni e Chimera mar UCSF). 114-W kod RC-LH116 gin 3.91 kod 4.16 Å, kaka giluwore) itiyogo kaka ranyisi mar ng’ado bura mar ariyo mar 3D. Gik ma itiyogo iketo e klas mokwongo mar 3D kendo ok gin gi tudruok motegno gi jowetegi. Overlap kata bedo maonge gi gik ma nenore maler mag gedo. Bang’ ng’ado bura mar ariyo mar 3D, ne oyier ng’at ma nigi ng’eyo ma malo moloyo [Kuom RC-LH114-W, ng’at achiel en ng’injo 377,703 (44.5%), kuom RC-LH116, nitie ng’injo ariyo kende, ka gin mana ng’injo 260,752 (4%). bang’ ng’ado bura mokwongo gi pogruok matin]. Gik ma oyiergo igolo kendo e boksi ma nigi piksel 400 kendo ilosogi ka itiyo gi yo ma 3D. Mask mar solvent iloso ka itiyo gi filta mokwongo mar 15Å ma kalo piny, piksel 3 ma medo lando kod mask mayom mar piksel 3. Ka itiyo gi CTF ma ng’ato ka ng’ato nyalo ng’ado, loso ng’ato ka ng’ato ma ng’ato ka ng’ato wuothoe kod round mar ariyo mar CTF ma ng’ato ka ng’ato ng’ado, loso mar 3D, loso gik ma nyalo ketho gik moko kod loso gik moko bang’e, itimo bang’ ng’ato ka ng’ato mondo omed loso gik ma yudore. Ka watiyo gi kwan mar 0.143, kwan mar gik ma ng’ato nyalo ng’ado e wi kwan mar RC-LH114-W kod RC-LH116 gin 2.65 kod 2.80Å, kaka giluwore. FSC mar ranyisi mogik onyis e ranyisi mar 2. S17.
<2Zepa> Protin duto ma luwore gi gik moko duto ma ng’ato nyalo yudo, oting’o gik moko duto ma ng’ato nyalo ng’eyo; LH1-α (PufA; nying' achiel: Q6N9L4); RC-L (PufL; ID mar ng'ato ka ng'ato: O83005); RC-M (PufM; ID mar ng'ato ka ng'ato: A0A4Z7); RC-H (PuhA; ID mar ng'ato ka ng'ato: A0A4Z9); Protin-W (PufW; ID mar Protin achiel: Q6N1K3). Ne otiyo gi ranyisi mar RC, ma nigi ranyisi mar protin ma RC-L, RC-M kod RC-H kod ranyisi mar kristal mar Rba. RC ne otigodo kaka ranyisi (ID mar PDB: 5LSE) (46). 10:10, 11. 10 Ti kod gige “map ma oromo” e Chimera mar UCSF mondo iket ranyisi ma olosi e map (47), ilos maber kaka protin olosi, kendo ilos gik ma nyalo konyo [4×BChl a (nying’ gik ma odong’ e od somo mar monomer = BCL), 2×BPh a (BPH), kit achiel kata ariyo mag UQ10 (U10), achiel ma ok en heme) 3,4-dihadroheksakarbonilkolin (QAK)] tiyo gi Coot (48) mar medo. Kaka QAK ok yudre e od somo mar monomer, ne oket paramita ka otiyo gi gige eLBOW ma ni e PHENIX (49).
Bang’e, ne oger ng’injo mar LH1. 10:10, 11. 10 E chakruok, ne itiyo gi gige gedo ma ng’ato nyalo ng’ado e PHENIX (49) mondo oger ng’ato ka ng’ato kuom gik ma luwore gi LH1 ka otiyo gi map kod gik ma luwore gi protin mag LH1-α kod LH1-β kaka gik ma itiyogo. Yier ng’injo ma opong’o ahinya mar LH1, goloe kendo ikete e Coot, med gi lweti ranyisi ma onge e iye, kendo ilos gi lweti ng’injo duto kapok imedo BCls ariyo a (BCL) kod ng’injo achiel (CRT) [kaluwore gi Rps ma owinjore Kido mar ng’injo mar LH1 kod gik ma ong’ere. Kido mag gik moko (17)]. Kopi ng’injo ma opong’o mar LH1, kendo iti gi “Gima itiyogo mar Keto Map” mar UCSF mondo iket e alwora ma ok en ranyisi ma ni machiegni mar ng’injo mar LH1, kae to ilos maber e Coot; dwoko yo ma kamano nyaka chop kama gik moko duto mag LH1 osetimnegi ranyisi. 114-W, kuom golo ng’injo ma ok oket e Coot, protin ipogo kowuok kuom gik ma ok gin protin ma odong’ e map mar Chimera mar USCF kendo itiyo gi gige gedo mag Autobuild mar keto ranyisi mokwongo, kendo gik ma odong’ (protin-W) loso ranyisi. E FINIKS (49). Med ranyisi moro amora ma olal e ranyisi ma yudore e Coot (48), kae to ilos gi lweti ng’injo duto. 10:10, 11. 10 Gik ma odong’ ma ok oketgi nyalo rwako ng’injo mar lipids (ID mar libri mar monomer mar PDB mar CDL = CDL, POPC = 6PL kod POPG = PGT), gik ma ng’ato nyalo ng’ado e wi ng’ato (LMT) kod gik ma ng’ato nyalo ng’ado e wi ng’ato (U10). Ti kod PHENIX maber (49) kod loso maber gi lwedo e Coot (48) mondo ilos maber ranyisi mokwongo ma opong’ nyaka chop kama kwan mar ranyisi kod ng’eyo ma nenore mar ranyisi ok nyal medore. Kae to, ti kod LocScale (50) mondo ilos map mar alwora, kae to itim gik mamoko mang’eny mag loso ranyisi mar kwan ma ok ogol kod loso gik ma nyalo timore gi lwedo.
<2Zepa> Peptide, kofaktor kod lipid mamoko kod kinone ma ochung’ e kind ng’injogi mopogore opogore onyisre e ranyisi 1 kod 2. S18 nyaka S23. Oboke mag kwan mar ranyisi mogik onyisre e Tebol S1.
Ka ok ondik yo machielo, rangi ma ng’ato nyalo ng’adogo ler ne ochoki e ler ma ng’ato nyalo ng’adogo lerno (Agilent, Amerka) e kind 1 nm kowuok e 250 nm nyaka 1000 nm kendo kinde mar riwruok mar 0.1s.
1000 nm, kendo choko gik ma nyalo ng’ado e kind 400 gi 1000 nm. 810 (Jasco, Japan) e kind 1 nm e kind 400 nm gi 950 nm e ng’wech mar 20 nm e min-1.
10μl mar 990μl mar buffer kata methanol, kendo chok spektrum mar ng’ado mapiyo mondo ogeng’ ketho mar BChl. 10:10, 11. 10 10:10, 11. 10 BChl ma ne ni e sampul ka sampul mar methanol ne okwan gi kwan mar gik ma nyalo kethore e 771 nm mar 54.8 mM-1 cm-1, kendo kwan mar gik ma nyalo kethore ne oket (51). (RC-LH114-W) kata 36 (RC-LH116) mondo ing’e kwan mar gik ma ng’ato nyalo ng’ado e wi ng’ato, ma bang’e itiyogo mar ng’eyo kwan mar gik ma ng’ato nyalo ng’ado e sampul maromre ma ne ochoki e buffer. line ariyo man ebath jowadgi. Ne otim pim adek ma ne odwokore kuom sampul ka sampul, kendo ne otiyo gi kwan mar ng’ato ka ng’ato ma ne nyalo ng’ado pi e BChl Qy ma ne oting’o pi mang’eny moloyo. 114-W ma opim e 878 nm en 3280 ± 140 mM-1 cm-1, to RC-LH116 ma opim e 880 nm en 3800 ± 30 mM-1 cm-1.
UQ10 ne opim kaluwore gi yo ma ne ondiki e (52). E yo machiek, ne otim nonro mar ng’ato ka ng’ato ka otiyo gi sistem mar ng’ado ng’ato. 0.02 nmol mar RC-LH116 kata RC-LH114-W e 50 μl mar 50:50 methanol: kloroform ma nigi 0.02% (w/v) mar kloraid mar chuma, kendo iketo gik ma osetimre motelo e m1. 40°C e HPLC (80:20: 2-propanol) e wi ng’injo ma borne romo sentimita 25. 275 nm (UQ10), 450 nm (karotenoids) kod 780 nm (BChl) kuom seche 1. Ne oket ng’injo ma ne ni e 275 nm e dakika 25.5, ma ne onge gi gik mamoko ma ne nyalo fwenyre. 10:10, 11. 14 Oganda ma ng’ato nyalo ng’ado bura kuom kwan mar molar mar UQ10 ma owuok kuom ng’ado kwan mar ng’ado kwan mar ng’ado kwan mar ng’ado kwan mar ng’ado kwan maler chakre 0 nyaka 5.8 nmol (Fweny S14). Sampol ka sampol ne otimne nonro e dwoko adek, kendo ketho ma ne ondiki ne luwore gi SD mar kwan ma ne otimre.
Ne oloso ng’injo ma nigi RC-LH1 ma nigi ng’injo maduong’ mar Qy ma romo 0.1 ma ne oting’o 30 μM ma ne odwoko piny e chuny faras (Merck, UK) kod 0 nyaka 50 μMUQ2 (Merck, Ingresa). Ne oloso sampol adek mag 1-ml e ng’ato ka ng’ato ma ne nigi UQ2 kendo ne oketgi e odiechieng’ achiel e mudho e 4°C mondo gine ni ne ginyalo ng’iyo chuth gi mudho kapok opim. Ne oket gik ma ne itiyogo e ng’iyo gik ma ne itiyogo e ng’iyo gik moko ma ne itiyogo gi 300 nm/500 line, 1.24 milimita mar donjo, 0.12 milimita e diere kod 0.6 milimita mar wuok. Filter ma bor mar 600 nm iketo e dhoot mar tipo mar ranyisi kod tipo mar ranyisi mar ranyisi mondo ogol ler ma kelo gombo. 550 nm ka kinde mar riwruok mar 0.15 s. <2Zepa> Rieny mar ng’ato nyalo ng’ado bura kuom LED ma nigi 880 nm M880F2 (Light Emitting Diode) (Thorlabs Ltd., UK) kokalo kuom kebo mar fiber optik ma nigi teko mar 90% kokalo kuom ng’at ma rito ler ma DC2200 (Thorlabs Ltd., UK) kendo owuok e kama lerno wuokie e angle mar 9°0. Gima ipimogo ochung’ne kiyo mondo odwoko ler moro amora ma ne ok okaw gi sampulno e chakruok. <2Zepa> 10 s kapok ler mar 50 s ochopo. Kae to ne otim nonro kendo kuom ng’ado ng’ato kuom seche 60 e mudho mondo ong’e kaka quinolol nyalo dwoko piny ng’ato owuon (neno ranyisi mar S8 mondo iyud weche ma ok otigodo).
Data ne otim kuom keto kwan mar chakruok ma linear e kind 0.5 nyaka 10 s (luwore gi kwan mar UQ2) kendo ng’ado kwan mar sampuli adek go duto e kwan moro ka moro mar UQ2. RC-LH1 kwan mar kwan mar kwan mar rumo moro ka moro ne otigodo e loko kwanno obed nyalo mar katalitik, ma ne oket e chakruok mar 2019 (OriginLab, Amerka), kendo ne oketi e ranyisi mar Michaelis-Menten mar ng’eyo nengo ma nenore mar Km kod Kcat.
10:10, 11. 10 Kaka ng’ato nyalo ng’eyo ni ng’ato nyalo ng’iyo gik ma ng’ato nyalo timo, ne oket ng’ato e IMAC ma ne nigi 50 mM mar sodium ascorbate (Merck, Amerka) kod 0.4 mM mar ng’injo mar ng’injo (Merck, Amerka). Asid mar askorbik itiyogo kaka ng’at ma chiwo elektron mag misango, kendo ng’at ma chiwo elektron madongo itiyogo kaka gik ma geng’o QB mondo ine ni ng’at ma chiwo elektron maduong’ odong’ ka odok piny (manyiso ni ok odok piny) e kinde duto ma itiyogo e pim. ml mar sampol omedi e sel ma ng’ato nyalo ng’ado (ma romo mita 0.1 e bor, 350 RPM) ma nigi bor mar yo mar wang’ ma romo 2 mm mondo one ni sampol ma ni e yo mar laser nigi thuolo moromo mar ng’iyo gi mudho e kind ng’wech mar ng’wech. 100-fs mar laser mondo omed ler mar Ti: Sistem mar laser mar safira (Fizik mar Spektra, Amerka) mondo okel ler mar 880 nm e kwan mar dwoko mar 1 kHz (20 nJ ne NIR kata 100 nJ ne Vis). Kapok ochoko weche, ket sampulno e ler ma kelo mor kuom dakika madirom 30. Ka ng’ato ochung’ e wang’e, mano biro miyo QA kik ti (nyalo bedo ni odwoko piny QA dichiel kata nyadi riyo). To ng’e ni yo ma kamano nyalo lokore nikech bang’ kinde malach mar ng’iyo gik moko e mudho, RC biro dok mos e tich mar QA. Ne otiyo gi gino ma ng’ato nyalo ng’iyogo gik ma ng’ato nyalo ng’iyogo (Helios (ma ng’ato nyalo ng’iyogo gik ma ng’ato nyalo ng’eyo mapiyo ahinya, Amerka)) mondo opim gik ma ng’ato nyalo ng’iyogo gik ma ng’ato nyalo ng’iyogo ma nyalo bedo -10 nyaka 7000 ps . Ti kod program mar surface Xplorer (Sistem mapiyo ahinya, Amerka) mar golo weche mondiki e grup, kae to iketgi kanyachiel kendo iketgi obed maromre. Ti kod program mar CarpetView (Light Conversion Ltd., Lithuania) mondo iti kod kwan mar data ma oriw mondo iyud spektra mopogore opogore ma tudruok gi ketho, kata tiyo gi tich ma oriwo eksponent mang’eny ma nigi dwoko mar gige tich mondo owinjore gi spektra ma nigi bor mar yamo achiel e OriginLa (Origin, Amerka).
Kaka ne owach malo kanyo (53), ne oloso filim ma nigi ng’injo mar LH1 ma onge RC kod antena mar LH2 ma ni e alwora. Ne oket ng’injono e tris ma romo 20 mM (pH 8.0) kae to ne okete e ng’injo ma ne nigi yo mar wang’ ma romo milimita 2. Ne otiyo gi 30nJ mar laser mar ng’ado ng’wech e 540 nm ka ng’ato nyalo ng’ado ng’wech mar -10 nyaka 7000 ps. Tiyo gi data ma oket kaka ondik kuom Rps. sampol mar osiep.
150,000 RCF kuom seche 2 e 4°C, kae to ng’injo mare ma ne oting’o 880 nm ne oket kendo e 20 mM tris-HCl (pH 8.0) kod 200 mM NaCl. Ong’ado ng’injo kuom ng’injo mos e 2% (p/v) mar β-DDM kuom seche 1 e mudho e 4°C. 100 mM triethylammonium carbonate (pH 8.0) (TEAB; Merck, UK) nyaka e kwan mar protin ma romo 2.5 mg ml-1 (ng’iyo mar Bio-Rad). Ne otim tich machielo kowuok e yo ma ne ogol chon (54), ka ochako gi keto 50 μg mar protin e 50 μg mag TEAB ma nigi 1% (w/v) mar ng’injo mar ng’injo (Merck, UK). Bang’ ng’ado ng’wech kuom seche 60, ne odwoko piny gi 5 mM tris (2-karboksietil) phosphine (Merck, UK) e 37°C kuom dakika 30. 10:10, 11. 10 Ka itiyo gi 10 mM mar methyl S-methylthiomethanesulfonate (Merck, UK) kendo imed gi 200 mM mar isopropanol kuom dakika 10 e ng’ich mar ot. Ne otim ng’ado bura kuom keto 2 μg mar trypsin/endoproteinase Lys-C (Promega UK) kendo ne okete e 37°C kuom seche adek. μl mar etyl asetat kod 10 μl mar 10% (v/v) mar LC mar asid mar trifluoroasetik (TFA; 15,700 RCF kuom dakika 5. Kaluwore gi kaka ng’at ma noloso gik moko noketo, ne otiyo gi gino ma iluongo ni C18 (Thermo Fisher Scientific, UK) mondo oting’e gi ritruok kendo ogol gik ma ng’injono nigo. Bang’ ka osetuo kuom ng’ado ng’ato gi ng’ato, ne oketo ng’injono e 0.5% TFA kod 3% mar asetonitril, kendo 500 ng ne otimne nonro kuom ng’injo mar nanoflow RP ma oriw gi ng’injo mar ng’injo mar ng’injo ka otiyo gi ranyisi mag sistem ma ne oler matut motelo.
1.5.3.30 (56) mar ng’eyo protin kod kwan mar protin mondo imany Rps. 1426) <2Zepa> Data mag spektrometry mag proteomy oseket e riwruok mar ProteomeXchange Alliance kokalo kuom kar keno mar jowete PRIDE (http) e bwo ranyisi mar dataset PXD020402.
Kaka ng’ato nyalo ng’iyo gi RPLC ka oriw gi ng’iyo mar ng’iyo gik ma ng’ato nyalo ng’iyogo, ne oloso RC-LH1 kowuok e Rps ma ng’ato nyalo ng’iyogo. Ka itiyo gi yo ma ne ogol chon (16), kwan mar protin ma ne olosi e sel mag ng’injo ne en 2 mg ml-1 e Hepes 20 mM (pH 7.8), 100 mM NaCl kod 0.03% (w/v) β- (ng’iyo mar Bio-Rad) ) DDM. Kaluwore gi chik mar jalony, ti kod kit mar ler mar 2D (GE Healthcare, Amerka) mondo igol 10 μg mar protin kokalo kuom yo mar ng’ado pi, kendo ng’ad pi ma ng’ado e 20 μl mar 60% (v / v) asid mar formik (FA), 20% (v / v) asetonitrile / 20% (v) pi (20%) (v / v) (20%). Ne otim nonro kuom RPLC (Dionex RSLC) ka oriw gi RPLC (Dionex RSLC) ma ne oriw gi RPLC (Maxis UHR-TOF, Bruker). 100 mm -1, gi ng’injo mar 85% (v / v) gik ma ng’injo A 0.1% (v/v) FA kod 0.02% (v/v) e 90% (v/v) TFA mar asetonitril TFA] Ka itiyo gi ng’injo ma ng’ato nyalo ng’adogo ng’ato kendo ng’ato nyalo ng’ado bura kuom dakika mokalo 60, spektromita mar ng’ato yudo 100 nyaka 2750 m/z (ratio mar ng’ato gi ng’ato). Ka itiyo gi kony mar gino ma itiyogo e ng’eyo weche mag piny ma iluongo ni ExPASy (FindPept), loso map mar spektrum mar mass nyaka e gik matin mag gik ma dongo dongo.
Ne odongo selgo kuom seche 72 e bwo ler ma romo 100 ml mar NF ma piny (10 μM-2 s-1), ma diere (30 μM-2 s-1) kata ma malo (300 μM-2 s-1). M22 (M22 ma ok oting’o ng’injo mar ng’injo kendo ng’injo mar ng’injo ma ok oket kar ng’injo mar ng’injo) e chumbe ma nigi 100 ml ma nigi skru (23). E ng’injo abich mag seche 30, ne iketo ng’injo mag glas ma nigi maikron 0.1 e kwan mar 1:1 mondo otur selgo kendo oketgi e wi baraf kuom dakika 5. Gik ma ok nyal ng’injo, sel ma ok otur kod gik ma ng’injo mag glas ne owuok kuom ketogi e RCF 16,000 kuom dakika 10 e masin matin ma ne ni e wi kom. 100,000 RCF e 20 mM tris-HCl (pH 8.0) ma nigi 40/15% (w/w) mar sukrose kuom seche 10.
Kaka ne olere e tijwa mokalo, ng’eyo kaka ng’ato nyalo ng’eyo ni ng’ato nigi ng’eyo matut kuom ng’ato. 11.8 nM) kata ng’injo ma nigi ng’injo maromre mar RC (ma ng’ere kuom oksidason ma golo spektrum mar pogruok ma odok piny kendo ma chal gi ting’ ma ni e wi gel ma nigi rangi) e 2x SDS ma oting’o buffer (Merck, UK) ma oting’o ng’injo nyadi riyo. Protingo ne opogore e wi gel ma nigi 12% mar bis-tris (ma ng’ato nyalo ng’eyo ni en ng’at ma ng’iyo gik moko e piny Ingresa). Ne oket gel moro gi rangi ma bulu ma ng’we ng’ar (Bio-Rad, UK) mondo oket kendo onene gik ma ng’ato nyalo ng’iyogo RC-L. Protin ma ne ni e gel mar ariyo ne oter e ng’injo ma ne itiyogo gi methanol (PVDF) mondo otimne nonro mar ng’injo mar del. <2Zepa> 50 mM tris-HCl (pH 7.6), 150 mM NaCl, 0.2% (v / v) 0.2% (v / v) powder mar chak ma ok oting’o ng’injo, kae to ne oketi gi gik ma geng’o HCl madongo (e buffer mar mH-5 150 mM NaCl kod 0.05% (v/v) mar Tween-20] e 1:1000 A190-114A, Laboratori mag Bethyl, Amerka) kuom seche 4. Bang’ lwoko ng’injono nyadi adek kuom dakika 5 e baffer mar geng’o tuoche, ne oketi ng’injono kanyachiel gi ng’injo mar ng’injo mar ng’injo mar ariyo (ma oting’o 1:10,000 e baffer mar geng’o tuoche matin) (Cyanagen, Itali) kod masin mar picha mar 600 (ge thieth mar thieth, piny Ingresa).
Ka itiyo gi ranyisi mar kaka ng’ato ka ng’ato ma nigi rangi kata ng’ado ng’wech mar ng’ato ka ng’ato, keto kanyakla kama ni e bwo ng’injo kendo kwano ng’injo mar RC-L (ng’injo ma nigi rangi) kod Protein-W (ng’injo mar ng’injo), e ImageJ (57) Tiyo gi picha. 114-W maler mar RC-LH114-W ne en 1:1 kendo ne oketo kwan mar data duto ma ne oket kaka pile kaluwore gi mano.
Mondo iyud gik ma medore mag ndiko maeni, yie mondo iyud gik ma medore e wi ndiko ni.
Mae en ndiko ma ji duto nyalo yudo kendo ma ipogo e bwo chike mag Laisn mar Keto Gik Motudore. Obokeno oyiene tiyo kode, ketogi, kendo losogi e yo moro amora maonge chik, ka ng’ato oting’o weche ma ne ondik e bugego mokuongo.
Par niya: Wakwayi mana ni imi adres mari mar e-mail mondo ng’at ma ioro e mbui ong’e ni idwaro ni one e-mailno kendo ni ok en e-mail ma ok owinjore. Ok wabi kawo adres moro amora mar e-mail.
Penjo ni itiyogo mar temo ka in jalendo kendo geng’o oro spam ma ok owinjore.
David JK Swainsbury, Park Qian, Philip J. Jackson, Kaitlyn M. Faries, Dariusz M. Niedzwiedzki, Elizabethn Martin, David A. Farmer, Lorna A.
Gik ma ng’ato nyalo ng’eyo maber kaka ler ma ng’ato nyalo ng’ado ler 1 ma ni e kar dwoko, miyo ng’ato bedo gi ng’eyo manyien kuom kaka quinone tiyo.
David JK Swainsbury, Park Qian, Philip J. Jackson, Kaitlyn M. Faries, Dariusz M. Niedzwiedzki, Elizabethn Martin, David A. Farmer, Lorna A.
Gik ma ng’ato nyalo ng’eyo maber kaka ler ma ng’ato nyalo ng’ado ler 1 ma ni e kar dwoko, miyo ng’ato bedo gi ng’eyo manyien kuom kaka quinone tiyo.
©2021 Riwruok mar Amerka mar Dongruok mar Sayans. ratiro duto oriti. AAAS en jahera mar Hinari, Agora, Oare, Chorus, Clocks, CrossRef kod counter. 2375-2548, Dhi nyime mar Sayans.